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買細胞售後關注什麼

發布時間:2023-05-03 10:30:10

『壹』 分享買細胞的血淚史

本人於2009年考上博士,准備做與表皮生長因子酪氨酸激酶抑制劑(EGFR-TKI)耐葯機制的課題。根據文獻報道,選購了人肺腺癌NCI-H1650和NCI-H1975兩株細胞。這兩個細胞在我沒進入實驗室之前,前輩在2008年在北京某個大細胞庫買的。於是我就用這兩個細胞做實驗,第一步就是檢測細胞是否有EGFR突變,按照文獻報道是有的。NCI-H1975很快就檢測出來了,合格。NCI-H1650就很怪了,怎麼飢孫檢測也檢測不出來,更奇怪的是檢測前一步擴增也不出。各種對照,各種改變都不行,我只好一邊誘導,一邊等。做MTT也發現,NCI-H1650細胞對吉非替尼也不敏感。實驗做了半年也沒有結果,分子生物學實驗的師妹是毫無辦法了,我綜合一分析,不對啊,只能是細胞株的問題了,我估計這個細胞株根本就不是人的,更別說是不是肺癌的了。於是查閱資料,從上海某個大細胞庫買了NCI-H1650和HCC-827兩株細胞,我一看,NCI-H1650形態與在北京買的不一樣,有門!馬上進行檢測,這次NCI-H1650細胞突變正確,但是HCC-827的沒有突變。我修正實驗,我不斷修正。因為細胞株的問題我耽誤了差不多一年的實驗時間。今年好不容易畢業啊!導師讓我幫著帶帶碩士小師妹,我遲型查閱文獻,看國內做PC-9的很多,決定買PC-9細胞,這次改變戰略,不從細胞庫買了,從公司買,應該能准點。在上海某公司買了,郵到後恢復狀態,又凍了兩管,馬上測序去,失望啊,還是沒有EGFR19外顯子的突變啊。趕緊上網找資料,一看人家做的PC-9細胞和我們的形態都不一樣。還好這次給退款了。 因此,爛旦鏈我總結在國內買到真細胞的幾率是非常低的,我們買了5株次,但是只買到了2個真的,幾率為40%。建議,要做細胞株的同學要在國內買,要看足夠的文獻,找到准確的形態,買之前先讓人家發個照片,形態合格後再確定是否買;如果有錢,直接從ATCC買吧,國內也有代理。
原文 分享買細胞的血淚史 - 生物技術 - 丁香通 (biomart.cn)

『貳』 購買細胞注意事項及技巧

還在各個平台發帖求助「如何**xx細胞」嗎?面對眼花繚亂的細胞廣告,究竟如何辨別才能避免踩雷,買到「貨真價實」的好細胞呢?下面這些購買細胞的避坑技巧,速速來碼!

避坑第1招:明確細胞信息

想要買對細胞,當然要知道自己要買的是什麼細胞,所以明確所購買的細胞信息是最基本的要求。其中細胞的全稱是一系列信息中最重要的,它往往包含有物種來源,組織來源等信息,讓我們能夠快速確定細胞身份。其次就是要判斷是選擇原代細胞還是細胞系。原代細胞能保持原有的遺傳特徵,適用於葯物測試、細胞分化和轉化等要求較高的實驗研究;永生化細胞系價格低、易培養、種類多、產量高;兩種細胞不僅在應用上有所差別,價格上差異也較大,需要根據自己的實驗需求進行判斷。這樣我們就能精準地表述購買需求,避免因為跟商家的溝通問題導致的細胞錯買、錯發。

避坑第2招:STR鑒定

提供細胞的STR鑒定結果是近年來被各大期刊雜志強調多次的事情了,包括NIH、ATCC、Nature和Science等都已多次發出呼籲。而許多研究人員因為使用了被交叉污染或辨識錯誤的細胞系,而導致實驗結果不可重復、研究結論被否定、論文被退回等難以讓人接受的結果,這相當於他們多年的心血頃刻間付之東流,更不用說那些因為研究結論的錯誤而導致在臨床細胞治療中產生的災難性後果。

作為目前公認的細胞鑒定方法,STR基因分型方法是進行細胞交叉污染和性質鑒定的最有效、最准確的方法之一,越來越多雜志開始要求投稿人提供細胞STR鑒定結果。因此,問清楚商家是否提供STR鑒定證書,查看STR鑒定結果是否真實,都是十分必要的。如果使用了沒有STR鑒定的細胞,在長達幾個月甚至幾年的科研工作即將結束之際,投稿的雜志要求提供細胞STR鑒定報告拿不出,結論被否定、論文被召回、耗費的努力與經費被浪費,一切都要從頭再來,這顯然得不償失。

避坑第3招:安全質啟遲量把關

一是明確細胞有無進行細菌、真菌及支原體污染檢測。支原體污染後,細胞內的DNA、RNA及蛋白表達發生改變,污染嚴重時細胞生長緩慢,細胞形態發生改變,並出現細胞病變。支原體污染是比較難處理,首先要從源頭保證支原體等污染。

二是需要重視細胞系的代數高低問題。隨著傳代的次數增加,細胞會出現生長狀態下降,出現突變等問題,導致實驗結果不理想,如蛋白表達譜發生變化等。盡量使用代次低、健康有活力的細胞,才能確保實驗可靠。

避坑第4招:專業的技術指導

跟商家確定完以上3點後,基本就能保障你所**的細胞是沒問題的冊碧,即便你真得倒霉到遇到了騙子,也能更好地進行維權。反倒是有些人細胞買對了,卻不會養,甚至以為是細胞本身的問題,那這鍋細胞不背。不過也不用著急,很多人會選擇詢問一些有經驗的人,比如師兄師姐,或者在網上發求助帖。而有些人的細胞平時看著沒問題,但是一做基因編輯,可能因為缺乏經驗導致細胞轉染或葯篩後狀態不好,細胞易死亡,轉染率低甚至基因編輯效率低下等。一般情況下,商家會提供一定的技術指導,但是基本只是細胞的常規培養,對於更多的基州旁舉因編輯實驗問題,也許找一個專業提供基因編輯服務的公司會更靠譜。

『叄』 我想去漢氏聯合幹細胞庫審查一下,誰能跟我說說我去之後,要重點關注哪些東西

主要看資質,證書,專利之類的,再就是看他們的科研實力,看實驗室,畢竟胎盤幹細胞是襪棗要從胎盤中提取出來的,對實驗室的要求也很高,聽說漢氏聯合這些都沒問御弊題,既然去都去了,告拆拆還是看看比較好。

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