⑴ 高效液相:安捷倫1100從開機到關機的全過程 感激不盡! 郵箱[email protected]
轉載:《分析測試網路網》
高效液相色譜儀(Agilent 1100型)操作規程
一、 開機
1、開機前准備:流動相使用前必須過0.45um的濾膜(有機相的流動相必須為色譜純;水相必須用新鮮注射用水,不能使用超過3天的注射用水,以防止長菌或長藻類); 把流動相放入溶劑瓶中。A瓶:為水相 B瓶:為有機相。
2、打開電腦,選Win 2000,進入Win 2000界面。
3、雙擊CAG Boodp server圖標,放大CAG Boodp server小圖標,出現窗口,5min內打開液相各部件電源開關,等待1100廣播信息後,表示通訊成功連接,關閉CAG Boodp serve窗口。
4、雙擊online圖標,儀器自檢,進入工作站。
該頁面主要由以下幾部分組成:
——最上方為命令欄,依次為File,Run Control,Instrumen…等;
——命令欄下方為快捷操作圖標,如多個樣品連續進行分析、單個樣品進樣分析、調用文件保存文件……等;
——中部為工作站各部件的工作流程示意圖;依次為進樣器-輸液泵-柱溫箱-檢測器-數據處理-報告;
——中下部為動態監測信號;
——右下部為色譜工作參數:進樣體積、流速、分析停止時間、流動相比例、柱溫、檢測波長等。
4、從「View」菜單中選擇「Method and control」畫面。
二、 編輯參數及方法
1、開始編輯完整方法:
從「Method」菜單中選擇「New method」,出現DEF-LC.M,從「Method」菜單中選擇「Edit entire method」,選擇方法信息、儀器參數及收集參數、數據分析參數和運行時間表等各項,單擊OK,進入下一畫面。
2、方法信息:
在「Method Comments」中加入方法的信息,如方法的用途等。單擊OK,進入下一畫面。
3、泵參數設定:
進入「Setup pump」畫面,在「Flow」 處輸入流量,如1ml/min;在「Solvent B」處輸入有機相的比例如70.0,(A=100-B),也可在Insert 一行「Timetable」,編輯梯度;輸入保留時間;在「Pressure Limits Max」處輸入柱子的最大耐高壓,以保護柱子。單擊OK,進入下一畫面。
4、DAD檢測器參數設定:
進入「DAD signals」畫面,輸入樣品波長及其帶寬、參比波長及其帶寬(參比波長帶寬默認值為100nm); 選擇Stoptime:as Pupm;
在「Spectrum」中輸入採集光譜方式「store」:選All;如只進行正常檢測,則可選None; 范圍Range:可選范圍為190~950nm; 步長Step可選2.0nm;
閥值: 選擇需要的燈;
Peak width(Response time)即響應值應盡可能接近要測的窄峰峰寬,可選「2s」或4s;
Slit-:狹窄縫,光譜解析度高;寬時,噪音低。可選4nm
單擊OK,進入下一畫面。
5、進入「Signal Details」畫面,單擊OK,進入下一畫面。
6、進入「Edit Integration Events」(編輯積分結果)畫面,單擊OK,進入下一畫面。
7、進入「Specify report」(積分參數)畫面,單擊OK,進入下一畫面。
8、進入「Instrument curves」畫面,單擊OK,進入下一畫面。
9、進入「Run Time checklist」(運行時間表)畫面,選擇「Date Acquistition」和「Standard Date Analsis」,單擊OK,完成參數設定,回到工作站畫面。
10、單擊「Method」菜單,選中「Save method as」,輸入文件名,單擊OK。(路徑:e\HPCHEM\1\methods\***)
註:如果調用一個方法,則在「Method」菜單,選中「Load method」,選方法名,單擊OK。
11、從菜單「View」中選擇「Online signal」,選中Window 1 ,然後單擊Change鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點OK。(如同時檢測二個信號,則重復11,選中Window 2)。
三、運行樣品
1、單擊泵(Pump)圖標下面的小瓶圖標,輸入溶劑的實際體積和瓶體積,並且選停泵體積。單擊OK。
2、手動打開Purge閥:逆時針轉2~3圈。
3、單擊泵(Pump)圖標,出現參數設定菜單,單擊Setup pump選項,進入泵編輯畫面。設Flow:5ml/min,單擊OK。
4、開泵:直接點Pump圖標下面的泵開關小圖標,或單擊Pump圖標,出現參數設定菜單,單擊Pump contrlo選項,選中On,單擊OK。
5、系統開始排液(Purge),直到管線內(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止,切換通道繼續排液,直到所有通道無氣泡為止。(每個管線內液體約20ml,在5ml/min的流速下,均需4~5min才能排完)
6、單擊泵(Pump)圖標,出現參數設定菜單,單擊Setup pump選項,進入泵編輯畫面。把Flow改為0.5~1.0ml/min,單擊OK。
7、等待流速降下來後,關閉排液閥。
8、待壓力穩定後,從「Instrument」菜單中選擇「System on」或單擊GUI圖標的On圖標啟動系統。開始走基線,並可選擇觀察信號。
註:儀器運行過程,畫面顏色由灰色轉變成黃色或綠色,當各部件都達到所設參數時,畫面均變為綠色,左上角紅色的「not ready」變為綠色「ready」,表明可以進行分析。(此時如果要終止儀器的運行,可單擊流程圖右下角的「off」,再單擊「Yes」,關閉輸液泵和檢測器氘燈)。
9、單擊最大化按鈕,將online Plot窗口放大。待基線平穩後,點信號窗口的「Banlance」,調至零點。
10、等儀器Ready ,從「Runcontrol」菜單中選擇F5或「Run method」。
11、編輯樣品信息:
從「Run control」菜單中選擇「Sample into」選項,選擇「Sample Info…..」,即打開了樣品信息頁面,輸入操作者(Operator Name)、數據存貯通道(Subdirectory)、樣品名(Sample Name)、進樣瓶號(Vial)、濃縮因子(Multipline)、稀釋因子(Dilution)、,「Data file」中選擇 「Prefix」,在Prefix框中輸入批號或日期等,在Counter框中輸入計算器的起始位,儀器會自動命名。(樣品量(Sample Amount)、內標量(ISID Amount)可不選,Location只對自動進樣器有用,不填則走空白,檢查干擾峰的來源。)
單擊OK。
12、進樣分析:
進樣閥扳到Load位置,插入注射器,注樣品,進樣後扳動閥至Inject位置。
13、進樣分析結束,點Close鍵退出樣品分析。
(注意:檢測完盡量要關DAD的燈,以保持燈的壽命。單擊DAD圖標,出現參數設定菜單,單擊control ,選擇關燈。)
四、數據分析方法編輯(可在offline下操作)
1、 從「View」 菜單中選「Date analysis」進入數據分析畫面。該頁面最上方為命令欄,依次為File ,Graphics,Integration……等。命令欄下為快捷操作圖標,如積分、校正、色譜圖、單一色譜圖調用、多色譜圖調用、調用方法、保存等。
2、 從「File」菜單中選「Load signal」,或單擊快捷操作的「單一色譜圖調用」圖標,選擇色譜圖文件名,單擊「OK」,畫面中即出現所調用的色譜圖。
3、 做圖譜優化,從「Graphics」菜單中選擇「Signal options」選項。從Ranges中選擇Auao scale及合適的顯示時間,單擊OK,或選擇「Use Ranges」調整。反復進行,直到圖的比例合適為止。
4、 積分
(1)先調用所要分析的色譜圖,從「Integration」中選擇「Auto integrate」,從「Integration」中選擇「Integration Results」,此時儀器將內置的積分參數給出積分結果。如積分結果不理想,再從「Integration」菜單中選擇「Integration Events」選項,或單擊快捷操作的「編輯/設定積分表」圖標,此時,在屏幕下方左側出現積分參數表,右側為積分結果,在積分參數表中按實際的要求輸入修改的參數,如斜率(Slope sensitivity)、峰寬(Peak width)、最小峰面積(Area reject)、最低峰高(Height reject)等。
(2)從「Integration」中選擇「Integrate」選項或單擊快捷操作的「對現有色譜圖積分」圖標,儀器即按照新設定的積分參數重新積分。
(3)若積分結果不理想,則修改相應的積分參數,直到滿意為止。
(4)完成後,單擊左邊的「ˇ」圖標,將積分參數存入方法。
5、 列印報告:
(1)從「Report」菜單中選擇「Specify report」選項,或單擊最右側快捷操作的「定義報告及列印格式」(右下角帶叉的報告畫面)圖標,進入列印畫面。
(2)根據實際要求選擇報告的格式和輸出形式等。可在「Calculate」右則的黑三角中選「Percent」(面積百分比),其它項不變。(如 「Destination」項下選擇「Screen」; 「Based On」選「Area」;「Sorted By」選「Signal」;「Repirt Style」選「Short」;選擇「Add chromatogram Output(列印色譜圖)」;選擇「With Calibrated Peaks」;選擇「Portrait」;可根據需要選擇「Size」)。
(3)單擊OK。
(4)選擇快捷操作的「報告預覽」圖標,可預覽報告的全貌。從「Report」菜單中,選擇「Print Report」,則報告列印到屏幕上,如想輸出到打字機上,則單擊「Print」,即可進行報告的列印。最後,單擊「close」退出此操作頁面。
6、 定量分析
如果需要進行標准曲線制備,可按此項進行操作。
(1)一級校正表的建立:
在「Data Analysis」界面下,調用最低濃度的色譜圖,在「欄「Calibration」下,選擇「New Calibration Table」,選擇「Automatic Setup Level」,並設校正級數為 「1」,單擊「OK」。在畫下方左側出現校正表,右側為校正圖。在畫面左下側的校正表中選擇所要的色譜峰,輸入校正級數、化學物名稱及濃度,如果採用內標法,需對內標峰進行標記。單擊OK,工作站提示是否刪除0濃度行,單擊Yes 。
(2)二級校正表的建立:
調用第二個色譜圖,在命令欄 「Calibration」下,選擇「Add Level」,設為「2」,單擊「OK」,在畫面左下側的校正表中輸入校正級數、化學物名稱及樣品濃度。(如需對校正表中的某些數據進行重新修正,可調用新的圖譜,在命令欄「Calibration」下,選擇「Recalibration」,並在校正表中輸入校正級數,樣品濃度。)此時,校正表右側自動繪制各組分的標准曲線,並進行線性回歸。單擊校正表中的「Print」,可進行列印。
五、關機
1、 關機前,用過緩沖鹽溶液必須先用100%的水沖洗系統(打開排液閥,調流速為5ml/min,沖洗約5 min,然後調流速為1ml/min,待流速降下來後,關閉排液閥,再沖洗沖洗約20 min);然後用甲醇同法清洗20min,然後關泵。
注意:此方法適用於反相色譜柱,而正相色譜柱應用適當的溶劑沖洗。
2、清洗進樣器:
將進樣器扳至Load的位置,用專用的注射器裝約10ml適當溶劑沖洗進樣器。
當使用緩沖溶液時,要用水沖洗進樣口,同時扳動進樣閥數次,每次數毫升。
3、退出化學工作站,及其它窗口,關閉計算機(用shut down)。
4、關掉Agilent 1100電源開關。
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⑵ 安捷倫高效液相的詳細操作步驟
自己的操作步驟,不是很規范,希望能幫到你
1、開機,先開儀器,後開電腦及操作軟體。
2、純甲醇沖洗柱子(甲醇需過濾膜並超聲脫氣)。
3、設置ABCD各相的比例,平衡流動相,至基線平穩。
4、設置進樣量,瓶號,流速等,進樣。
5、跑圖。
6、進下一針
7、實驗完畢,95%甲醇-5%水沖洗柱子30-60min,純甲醇沖洗柱子30-60min,至基線平穩。
8、軟體關閉泵,進樣器等;關閉操作軟體;關閉儀器各個開關;關電腦
⑶ 安捷倫高效液相操作步驟
請問你用的是什麼型號的,安捷倫的官方網站或者打800-820-3278的電話,告訴對方你的型號,要求發一份現場培訓教材給你,如果你有一定色譜基礎,應該能很輕松上手的。再不行留個qq號在這里我發給你並交你。
⑷ 安捷倫液相紫外燈點火後感覺卡住了
安捷倫液相紫外燈點火後感覺卡住了1. 無峰或非常小的峰 可能的原因:檢測器關閉、與記錄器的連接斷開、無樣品/樣品錯誤、記錄儀或檢測器上的設置錯誤; 維修方法:1、檢查檢測器
2. 無流量 可能的原因:抽空、流中斷、泄漏、系統中滯留的空氣 維修方法:1、啟動泵2、檢查水庫3、檢查入口管的位置4、檢查迴路是否有阻塞或空氣5
⑸ 安捷倫液相檢測器模塊外殼怎麼拆
安捷倫液相檢測器模塊外殼拆卸方法如下:
1、斷開電源和連接線。
2、移除金屬外殼,再將裡面的塑料模塊提起。
3、把各個模塊接在主板上的線拔下來,依次拿出各個模塊即可。
⑹ 求安捷倫1260液相色譜 工作站的詳細操作方法
一、開機:
1、打開電腦;
2、打開液相色譜各個模塊的電源;
3、雙擊桌面「LC1260(Online)」,進入聯機界面;
二、排氣:
1、手動旋開泵處沖洗閥(逆時針旋轉約1圈)
2、右鍵單擊「Pump」圖標區域,選擇「Method」選項,進入泵編輯畫面,設流速:5ml/min,點擊「確定」;
3、右鍵單擊「Pump」 圖標區域,點擊「Control」選項,選中「ON」,點擊「確定」,則系統開始沖洗,直到
管線內(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止(一般為5分鍾),切換通道繼續沖洗,直到所有要用通道
無氣泡為止;
4、右鍵單擊「Pump」 圖標,點擊「Method」選項,設流速:0ml/min,手動旋緊沖洗閥;
5、右鍵單擊「Pump」圖標,點擊「Method」選項,按照方法要求選擇合適比例的流動相,設流速:1.0ml/min;(不一定是1);
6、同理右鍵單擊「Column Comp」,「DAD」圖標,點擊「Method」選項,按照;
7、方法的要求設置溫度,波長,點擊「控制」 選項,「ON」打開柱溫箱和檢測器;
三、編輯方法:
1、點擊「Method」—— 「Edit EntireMethod」開始編輯完整方法;
2、選中除「Data Analysis 」外的三項,進入下一選項卡,選擇「Als」(自動進樣),點擊「OK」,進入下一選項;
3、選擇「Method」菜單下「Method Information」選項,在「Method Comments」中加入方法的信息(如:
This is for test!),選擇「OK」,進入下一選項;
4、泵參數設定:右鍵單擊「Pump」圖標,點擊「Method?」選項,設置「Flow」:如1.0ml/min;「Stop
Time」:如10 min(該停止時間僅為做一個樣品需要的時間),按照要求選擇合適比例的流動相配
比,選擇「OK」,進入下一選項;
5、自動進樣器參數設定:右鍵單擊「Sampler」圖標,點擊「Method」選項,選擇「Injection volume」,輸
入進樣體積,選擇「OK」,進入下一選項;
6、柱溫箱參數設定:右鍵單擊「Column Comp」,點擊「Method」選項,設置「Left」溫度(可設置溫度范
圍:低於室溫10℃-80℃),一般「Left」和「Right」溫度一致,選擇「Combined」綁定即可,「Stop
Time」選擇「As Pump /Injector」,選擇「OK」,進入下一選項;
7、UV檢測器參數設定: 右擊「DAD」 ,點擊「Method?」選項,下方的空白處輸入所需的檢測波長(可
根據需要選擇多個波長,最多可選8個波長);「Stop Time」選擇「As Pump /Injector」;「Spectrum」
——「Store」選項下,根據需要選擇 「None」或「All(全波長掃描)」等選項,選擇「OK」,進入下一選
項;
8、編輯方法完畢,從「Method」菜單中,選中「Save Method As」,輸入一方法名,選擇「OK」,保存方
法成功。
9、單針進樣
10、從「Run Control」菜單中,選擇「Sample Information」選項,輸入「Operator Name」;在「Data File」中
選擇「Path」和 「Prefix/Counter(文件命名)」設置「Prefix(一般設置為年月日)」和「Counter」;輸
入「Location(樣品位置)」和「Sample Name」,選擇「OK」,進入下一選項;
11、基線平穩後選擇「Run Control」中的「Run Method」選項,開始進樣。
四、序列進樣:
1、選擇「Sequence」菜單下「 Sequence Table」選項,在「Confiqure Table」中選擇需要選項,一般
為「Vial(樣品瓶)」,「Sample Name(樣品名稱)」,「Method Name(方法名稱)」,「Inj/Vial(進樣次
數)」,「Sample Type(樣品類型)」,「Datafile(文件名)」和「Inj Volume(進樣體積)」;
2、點擊「Inset」生成一行,設置上述參數,選中該行,點擊「Copy」和「Paste」復制後修改相應參數,即
生成序列表,選擇「OK」,進入下一選項;
3、點擊「Sequence」菜單下「 Sequence Parameters」選項,選擇序列數據的「Path」(序列會自動生成
以「序列名稱-時間」為名稱的文件夾保存數據),數據建議選擇 「Prefix/Counter」保存;
在「Shutdown」選項下選中「Post-Sequence Command/Macro」,根據需要選擇「PUMPALL OFF(序列
結束後關閉泵)」」 「LAMPALL OFF(序列結束後關閉紫外燈)」」 「STANDBY(序列結束後關閉紫外燈
和泵)」,選擇「OK」,進入下一選項;(註:若「Path」中默認保存於C盤,則可點擊「View」,選
擇「Preferences」,根據需要添加相應的「SequenceTemplates」「Data」「Master Methods」保存路徑)
4、從「Sequence」菜單,選中「Save Sequence Template As」,輸入一序列名,選擇「OK」,即可;
5、基線平穩後選擇「Run Control」中的「Run Sequence」選項,開始序列進樣。
(註:若中途停止運行,則選擇「Run Control」中的「Stop Run/Inject/ Sequence」可保留圖譜信息,若選
擇Abort,則所有圖譜信息都丟失)
五、數據分析(離線狀態使用):
1、雙擊「LC1260(Offline)」圖標進入的離線畫面
2、從「View」菜單中,點擊「Data Analysis」進入數據分析畫面
3、從「File」菜單選擇「Load Signal」,選中所需的數據文件名,點擊「OK」,則數據被調出。
4、譜圖優化:從「Graphics」菜單中選擇「Signal Options」。從「范圍」 中選擇「Full」或「Use Ranges」 選擇
所需「Time Range」和「Response Range」,選擇「OK」;從「Integration」中選擇「Integration Events」,調
整「Area Reject」和「Height Reject」刪除雜峰;點擊「Set Integration」圖標,可選擇性消除不需要的積
分,若想消除該操作,則選擇「Method Manual Events」上排左起第5個圖標進行移除操作即可,點擊
左邊「√」圖標,將積分參數存入方法並退出「Integration Events」。
(註:「Set Integration」圖標為)
六、標准曲線繪制:
1、選擇「Calibration」菜單下「New Calibration Table」,選擇「Automatic Setup」中「Level(即標曲中對應
的點,第一個點即為1)」和「Defanlt Amount(標准品對應點的濃度)」,選擇「OK」;
2、通過選擇「Calibration」菜單下的「Add Level」選項依次添加各點參數,若為外標法,在「ISTD」項下
選「NO」,若為內標法則選「Yes」;「#」項下對應標准品和內標無的數字的應統一;若想更改標准曲線中
的對應點;
3、選擇「Calibration」菜單下的「Recalibrate」項的「Mode」選項,選擇「Average」則表示取當前點與標曲
中對應點的平均值替代標曲中原對應點,若選擇「Replace」則表示將當前點取代標曲中對應點;
(註:修改「Defanlt Amount」中濃度單位的方法:選擇「Calibration」項下「Calibration Setting」,修
改「Amount Units」,設置濃度單位;選擇「Calibration」項下「Calibration Setting」,修改「Default
CalibrationCurve」,選擇合適的曲線類型-Type,是否過原點-Origin和各點對於標准曲線的比重-
Weight,通常選Equal)
4、調出樣品譜圖,點擊需要計算濃度的色譜峰,選擇「Report」 菜單中的「Specify Report」,選
擇「Report style」為「Detail」,點擊「OK」後選擇「列印預覽」圖標,在報告中即可體現計算結果。
七、 圖譜重疊設置:
1、選擇「File」菜單下「Overlay Signal」選項,選擇任意需要重疊的圖譜;
2、在「Signal」選項下,選擇「3D Signal Overlay」圖標(緊鄰圖譜上方左起第四個圖標),在彈出
的「Adjust Signal OverlayOptions」對話框中調節交錯時間和高度;若想移除重疊譜圖,點擊第六個圖
標。
八、信噪比等參數計算:
1、選擇「Report」菜單中的「System Suitability」項下的「Edit Noise Range」選項,設置時間范圍(超過
1min);
2、選擇「Report」 菜單中的「Specify Report」,選擇「Report style」為「Perfomance+Noise」,點
擊「OK」後,即可預覽信噪比參數;
3、選擇「Report」 菜單中的「Specify Report」,選擇「Report style」為「Extended Perfomance」,點
擊「OK」後,即可預覽對稱性、拖尾因子等所有參數。
九、程序運行時檢測出峰情況:
選擇「File」菜單下的「Snapshot」選項即可。
十、列印報告:
1、從「Report」菜單中選擇「Report Mode」,選擇「Use Classic Reporting」;
2、從「Report」菜單中選擇「列印報告」,則報告結果將被列印。
十一、關機:
1、沖洗色譜柱和系統後,退出化學工作站及其它窗口,關閉計算機;
2、關閉Agilent 1260各模塊電源開關。
(6)安捷倫高效液相維修視頻擴展閱讀
定義:液相色譜是一類分離與分析技術,其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如
紙、薄板和填充床等。在色譜技術發展的過程中.為了區分各種方法,根據固定相的形式產生
了各自的命名,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
基本原理:使用高效液相色譜時,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由
於被測物種不同物質與固定相的相互作用不同,不同的物質順序離開色譜柱,通過檢測器得到
不同的峰信號,最後通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質。高效液相色譜作為一
種重要的分析方法,廣泛地應用於化學和生化分析中。高效液相色譜從原理上與經典的液相色
譜沒有本質的差別,它的特點是採用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,適於
分析高沸點不易揮發、分子量大、不同極性的有機化合物。
高效液相色譜系統主要由流動相儲液瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄儀組成,其整體
組成類似於氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。高效液相色譜的輸液泵要求
輸液量恆定平穩,進樣系統要求進樣便利、切換嚴密。同時,由於液體流動相黏度遠遠高於氣體,
為了減低柱壓,高效液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小於氣相色譜柱。
⑺ 安捷倫高效液相1260沖系統漏液怎麼辦
Agilent 1260 HPLC 操作規程 1 開機 1.1 打開電腦 1.2 打開液相色譜各個模塊的電源 1.3 雙擊桌面「LC1260(Online)」,進入聯機界面 1.4 排氣: 1.4.1 手動旋開泵處沖洗閥(逆時針旋轉約1圈) 1.4.2 右鍵單擊「Pump」圖標區域,選擇「Method」選項,進。
⑻ 安捷倫液相檢測器模塊怎麼拆
1、斷開電源和can連接線。
2、移除金屬外殼,再將裡面的塑料模塊提起,拿開,就能見到裡面的構造了。
3、庖丁解牛(應該是大z解機),就是把各個模塊接在主板上的線拔下來,在依次拿出安捷倫液相檢測器模塊即可。