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买细胞售后关注什么

发布时间:2023-05-03 10:30:10

『壹』 分享买细胞的血泪史

本人于2009年考上博士,准备做与表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)耐药机制的课题。根据文献报道,选购了人肺腺癌NCI-H1650和NCI-H1975两株细胞。这两个细胞在我没进入实验室之前,前辈在2008年在北京某个大细胞库买的。于是我就用这两个细胞做实验,第一步就是检测细胞是否有EGFR突变,按照文献报道是有的。NCI-H1975很快就检测出来了,合格。NCI-H1650就很怪了,怎么饥孙检测也检测不出来,更奇怪的是检测前一步扩增也不出。各种对照,各种改变都不行,我只好一边诱导,一边等。做MTT也发现,NCI-H1650细胞对吉非替尼也不敏感。实验做了半年也没有结果,分子生物学实验的师妹是毫无办法了,我综合一分析,不对啊,只能是细胞株的问题了,我估计这个细胞株根本就不是人的,更别说是不是肺癌的了。于是查阅资料,从上海某个大细胞库买了NCI-H1650和HCC-827两株细胞,我一看,NCI-H1650形态与在北京买的不一样,有门!马上进行检测,这次NCI-H1650细胞突变正确,但是HCC-827的没有突变。我修正实验,我不断修正。因为细胞株的问题我耽误了差不多一年的实验时间。今年好不容易毕业啊!导师让我帮着带带硕士小师妹,我迟型查阅文献,看国内做PC-9的很多,决定买PC-9细胞,这次改变战略,不从细胞库买了,从公司买,应该能准点。在上海某公司买了,邮到后恢复状态,又冻了两管,马上测序去,失望啊,还是没有EGFR19外显子的突变啊。赶紧上网找资料,一看人家做的PC-9细胞和我们的形态都不一样。还好这次给退款了。 因此,烂旦链我总结在国内买到真细胞的几率是非常低的,我们买了5株次,但是只买到了2个真的,几率为40%。建议,要做细胞株的同学要在国内买,要看足够的文献,找到准确的形态,买之前先让人家发个照片,形态合格后再确定是否买;如果有钱,直接从ATCC买吧,国内也有代理。
原文 分享买细胞的血泪史 - 生物技术 - 丁香通 (biomart.cn)

『贰』 购买细胞注意事项及技巧

还在各个平台发帖求助“如何**xx细胞”吗?面对眼花缭乱的细胞广告,究竟如何辨别才能避免踩雷,买到“货真价实”的好细胞呢?下面这些购买细胞的避坑技巧,速速来码!

避坑第1招:明确细胞信息

想要买对细胞,当然要知道自己要买的是什么细胞,所以明确所购买的细胞信息是最基本的要求。其中细胞的全称是一系列信息中最重要的,它往往包含有物种来源,组织来源等信息,让我们能够快速确定细胞身份。其次就是要判断是选择原代细胞还是细胞系。原代细胞能保持原有的遗传特征,适用于药物测试、细胞分化和转化等要求较高的实验研究;永生化细胞系价格低、易培养、种类多、产量高;两种细胞不仅在应用上有所差别,价格上差异也较大,需要根据自己的实验需求进行判断。这样我们就能精准地表述购买需求,避免因为跟商家的沟通问题导致的细胞错买、错发。

避坑第2招:STR鉴定

提供细胞的STR鉴定结果是近年来被各大期刊杂志强调多次的事情了,包括NIH、ATCC、Nature和Science等都已多次发出呼吁。而许多研究人员因为使用了被交叉污染或辨识错误的细胞系,而导致实验结果不可重复、研究结论被否定、论文被退回等难以让人接受的结果,这相当于他们多年的心血顷刻间付之东流,更不用说那些因为研究结论的错误而导致在临床细胞治疗中产生的灾难性后果。

作为目前公认的细胞鉴定方法,STR基因分型方法是进行细胞交叉污染和性质鉴定的最有效、最准确的方法之一,越来越多杂志开始要求投稿人提供细胞STR鉴定结果。因此,问清楚商家是否提供STR鉴定证书,查看STR鉴定结果是否真实,都是十分必要的。如果使用了没有STR鉴定的细胞,在长达几个月甚至几年的科研工作即将结束之际,投稿的杂志要求提供细胞STR鉴定报告拿不出,结论被否定、论文被召回、耗费的努力与经费被浪费,一切都要从头再来,这显然得不偿失。

避坑第3招:安全质启迟量把关

一是明确细胞有无进行细菌、真菌及支原体污染检测。支原体污染后,细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变,污染严重时细胞生长缓慢,细胞形态发生改变,并出现细胞病变。支原体污染是比较难处理,首先要从源头保证支原体等污染。

二是需要重视细胞系的代数高低问题。随着传代的次数增加,细胞会出现生长状态下降,出现突变等问题,导致实验结果不理想,如蛋白表达谱发生变化等。尽量使用代次低、健康有活力的细胞,才能确保实验可靠。

避坑第4招:专业的技术指导

跟商家确定完以上3点后,基本就能保障你所**的细胞是没问题的册碧,即便你真得倒霉到遇到了骗子,也能更好地进行维权。反倒是有些人细胞买对了,却不会养,甚至以为是细胞本身的问题,那这锅细胞不背。不过也不用着急,很多人会选择询问一些有经验的人,比如师兄师姐,或者在网上发求助帖。而有些人的细胞平时看着没问题,但是一做基因编辑,可能因为缺乏经验导致细胞转染或药筛后状态不好,细胞易死亡,转染率低甚至基因编辑效率低下等。一般情况下,商家会提供一定的技术指导,但是基本只是细胞的常规培养,对于更多的基州旁举因编辑实验问题,也许找一个专业提供基因编辑服务的公司会更靠谱。

『叁』 我想去汉氏联合干细胞库审查一下,谁能跟我说说我去之后,要重点关注哪些东西

主要看资质,证书,专利之类的,再就是看他们的科研实力,看实验室,毕竟胎盘干细胞是袜枣要从胎盘中提取出来的,对实验室的要求也很高,听说汉氏联合这些都没问御弊题,既然去都去了,告拆拆还是看看比较好。

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